ELISA（酶聯(lián)免疫吸附法）是一種免疫學(xué)檢測技術(shù)，廣泛用于檢測各種生物分子，如蛋白質(zhì)、細(xì)胞因子、激素等。在使用ELISA試劑盒進(jìn)行檢測時(shí)，正確的樣本處理方法對于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。下面是不同類型樣本的處理方法：
血清樣本：
收集血液樣本后，讓其在室溫下自然凝固10-20分鐘。
離心20分鐘（通常在2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清液。
如果出現(xiàn)沉淀，需要再次離心。
血清樣本應(yīng)在-20°C或-80°C下保存，避免反復(fù)凍融。
血漿樣本：
根據(jù)標(biāo)本要求選擇合適的抗凝劑（如EDTA或檸檬酸鈉）。
混合抗凝劑和血液樣本10-20分鐘后離心，同血清樣本一樣收集上清。
同樣需要避免溶血和高血脂，并在低溫下保存。
尿液樣本：
用無菌管收集尿液樣本，離心20分鐘。
收集上清液，如果出現(xiàn)沉淀則再次離心。
尿液樣本的處理和保存方法與血清、血漿類似。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：
收集細(xì)胞培養(yǎng)液，離心去除細(xì)胞碎片。
如果檢測分泌性成分，直接用無菌管收集上清。
如果檢測細(xì)胞內(nèi)成分，需用PBS稀釋細(xì)胞懸液，通過凍融破壞細(xì)胞，然后離心收集上清。
組織樣本：
切割組織后稱重，加入PBS（pH7.4）。
快速冷凍并保存于液氮中。
解凍后，用PBS稀釋并勻漿。
離心后收集上清液進(jìn)行檢測。
在處理樣本時(shí)，還應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：
使用無菌、無熱原和內(nèi)毒素的試管或離心管。
避免在采集和處理樣本過程中造成溶血。
樣本應(yīng)新鮮，避免長時(shí)間存放。
嚴(yán)格遵循試劑盒說明書和實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范。
正確的樣本處理是確保ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵步驟，因此需要仔細(xì)操作，避免污染和誤差